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1° bach · Ciencia y Tecnología
La biología celular · La célula y su organización

La observación de la célula

Imaginá que tomás una gota de agua del lago de Coatepeque y la mirás al microscopio del laboratorio del centro escolar. Ves algas y protozoos nadando, pero si intentás distinguir su membrana o sus orgánulos, solo hay una masa transparente sin detalle. ¿Qué cambia entre la luz y los electrones para que se necesiten dos tipos de microscopio tan distintos? Lo resolveremos al final de la página.

Microscopía óptica y electrónica

Comparación en corte de un microscopio óptico, donde la luz visible de una lámpara atraviesa una muestra viva y se enfoca con lentes de vidrio hasta el ojo, y un microscopio electrónico de transmisión, donde un haz de electrones viaja en una columna en vacío, atraviesa una muestra muerta y deshidratada y se enfoca con lentes electromagnéticas hasta una pantalla fluorescente. Microscopio óptico (MO) Microscopio electrónico (ME) de transmisión (MET) ojo lente ocular lente objetivo muestra viva (portaobjetos) condensador lámpara (luz visible) cañón de electrones lente condensadora muestra muerta y deshidratada lente objetivo lente proyectora columna en vacío pantalla fluorescente luz visible · lentes de vidrio permite observar células vivas haz de electrones · vacío lentes electromagnéticas (bobinas)
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Distinguí entre microscopía óptica y microscopía electrónica: qué utiliza cada una para «iluminar» la muestra, qué tipo de estructuras permite observar cada técnica y si…

Distinguí entre microscopía óptica y microscopía electrónica: qué utiliza cada una para «iluminar» la muestra, qué tipo de estructuras permite observar cada técnica y si es posible observar células vivas con ellas.

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La lupa binocular

En el laboratorio del centro escolar también hay una lupa binocular. Tiene dos oculares, uno para cada ojo, y dos caminos ópticos ligeramente distintos dentro del instrumento, de modo que cada ojo recibe una imagen desde un ángulo algo diferente; por eso la imagen se ve en relieve, tridimensional. Su aumento es menor que el del microscopio (entre $10\times$ y $40\times$), pero permite observar objetos enteros y gruesos, sin cortarlos: una hoja, una flor, un insecto o una semilla de maíz de la huerta escolar. Se usa con luz que ilumina desde arriba o desde abajo.

El microscopio óptico y su aumento

Al mirar una preparación de cebolla con distintas combinaciones de lentes, el tamaño de las células cambia mucho. ¿Cómo determinan juntos el objetivo y el ocular el tamaño final de lo que ves?

Microscopio óptico visto de perfil con ocular, revólver con objetivos, platina, tornillos de enfoque y fuente de luz; el objetivo forma una imagen real ampliada dentro del tubo y el ocular la amplía de nuevo, de modo que ocular 10× por objetivo 100× da un aumento total de 1000×. ocular imagen real revólver objetivo platina fuente de luz tornillos macrométrico y micrométrico ocular 10× × objetivo 100× = 1000× aumento total
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Nombrá las partes básicas de un microscopio óptico (ocular, objetivos, platina, tornillos macrométrico y micrométrico y fuente de luz) e indicá la función de cada una de…

Nombrá las partes básicas de un microscopio óptico (ocular, objetivos, platina, tornillos macrométrico y micrométrico y fuente de luz) e indicá la función de cada una de ellas.

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Explicá la diferencia entre aumento y poder de resolución de un microscopio y razoná por qué aumentar mucho una imagen sin mejorar la resolución (el llamado «aumento…

Explicá la diferencia entre aumento y poder de resolución de un microscopio y razoná por qué aumentar mucho una imagen sin mejorar la resolución (el llamado «aumento vacío») no permite distinguir más detalles.

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El poder de resolución

Si ampliás en la computadora una foto de mala calidad, se hace enorme, pero no aparecen detalles nuevos. ¿Por qué el aumento no sirve si el instrumento no distingue dos puntos muy cercanos?

Escala comparativa de resolución que confronta los límites del ojo humano (0.1 mm), el microscopio óptico (200 nm) y el microscopio electrónico de transmisión (0.2 nm) con el tamaño de células, bacterias, virus y moléculas. MET · desde 0.2 nm MO · desde 200 nm ojo · desde 0.1 mm átomo proteína ribosoma virus bacteria célula eucariota huevo de rana 0.1 nm1 nm10 nm 100 nm1 µm10 µm 100 µm1 mm escala logarítmica

Limitaciones prácticas del microscopio electrónico frente al óptico: es muy caro y voluminoso, exige muestras muertas, deshidratadas y en vacío, y su preparación es larga y puede producir artefactos. Las imágenes son en blanco y negro (los colores se añaden después por computadora).

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El esquema muestra una escala de tamaños con los límites de resolución del ojo humano, del microscopio óptico (MO) y del microscopio electrónico de transmisión (MET).…

El esquema muestra una escala de tamaños con los límites de resolución del ojo humano, del microscopio óptico (MO) y del microscopio electrónico de transmisión (MET). Indicá qué instrumento necesitarías para observar con detalle: a) un virus de la gripe; b) una bacteria; c) un ribosoma; d) una célula de la piel. Justificá cada elección a partir del esquema.

MET · desde 0.2 nm MO · desde 200 nm ojo · desde 0.1 mm átomo proteína ribosoma virus bacteria célula eucariota huevo de rana 0.1 nm 1 nm 10 nm 100 nm 1 µm 10 µm 100 µm 1 mm escala logarítmica
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El microscopio electrónico revela orgánulos y virus que el óptico no puede mostrar. Explicá a qué propiedad del haz de electrones se debe su mayor poder de resolución y…

El microscopio electrónico revela orgánulos y virus que el óptico no puede mostrar. Explicá a qué propiedad del haz de electrones se debe su mayor poder de resolución y señalá dos limitaciones prácticas de la microscopía electrónica frente a la óptica.

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La preparación de la muestra

Casi todo lo que hay en una célula es transparente. Para verlo hay que preparar la muestra, y la preparación cambia según el microscopio.

Esquema comparativo de la preparación de muestras: en microscopía óptica, corte fino y tinción; en microscopía electrónica, fijación, deshidratación, inclusión en resina, corte ultrafino y contraste con metales pesados. microscopía óptica corte fino + tinción microscopía electrónica fijación deshidratación inclusión en resina corte ultrafino contraste con metales pesados
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La mayoría de las muestras biológicas se tiñen antes de observarlas al microscopio óptico. Explicá dos razones para teñir una muestra y nombrá un colorante de uso…

La mayoría de las muestras biológicas se tiñen antes de observarlas al microscopio óptico. Explicá dos razones para teñir una muestra y nombrá un colorante de uso frecuente en el laboratorio escolar.

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Elegir técnica y separar por tamaño

Cuando tenés una mezcla, o querés ver algo muy pequeño como un virus, razoná con los tamaños: un instrumento solo muestra lo que es mayor que su límite de resolución, y un filtro solo retiene lo que es mayor que sus poros.

Para comprobar si hay virus que infectan bacterias (bacteriófagos), el MO no sirve, pues son mucho menores que 200 nm; se usa el MET. Se esperaría ver partículas con cabeza y cola adheridas a la pared de la bacteria y, en infecciones avanzadas, nuevas partículas dentro de la célula.

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Dispones de una suspensión acuosa que contiene una mezcla desconocida de cuatro componentes biológicos: partículas del virus de la gripe (~100 nm), células de…

Dispones de una suspensión acuosa que contiene una mezcla desconocida de cuatro componentes biológicos: partículas del virus de la gripe (~100 nm), células de Escherichia coli (~2 µm), eritrocitos humanos (~7.5 µm) y ribosomas purificados (~25 nm). En el laboratorio cuentas con filtros de membrana con poros de 0.22 µm y de 5 µm, un microscopio óptico (límite de resolución: 0.2 µm) y un microscopio electrónico de transmisión.

Diseña un procedimiento analítico en dos fases (separación por filtración sucesiva e inspección microscópica) que permita separar e identificar de forma inequívoca cada uno de los cuatro componentes. Justifica en qué fracción (retenido o filtrado) quedará cada componente en cada paso y razona qué instrumento microscópico específico es indispensable para confirmar la presencia y morfología de cada uno, deduciendo por qué el microscopio óptico resulta inútil para dos de ellos.

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Un equipo de investigación quiere comprobar si las bacterias de una muestra están infectadas por bacteriófagos. Diseñá el estudio: elegí la técnica de microscopía…

Un equipo de investigación quiere comprobar si las bacterias de una muestra están infectadas por bacteriófagos. Diseñá el estudio: elegí la técnica de microscopía adecuada, justificá la elección frente a las alternativas y describí qué esperaría observar el equipo si la infección se estuviera produciendo.

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Volvé al principio: en la gota del lago, la luz visible no puede separar estructuras menores de unos $200$ nm, así que la membrana y los orgánulos no se resuelven; los electrones, con una longitud de onda mucho menor, sí lo lograrían, pero solo con células muertas, deshidratadas y en vacío.

Resumen

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