La observación al microscopio
En la clase de Ciencias de la Vida, tu maestra te entrega una cebolla y te dice que dentro hay «ladrillitos» invisibles. A simple vista no se ven: las células son demasiado pequeñas. Para verlas hace falta un instrumento que las agrande cientos de veces. El microscopio óptico es la herramienta básica del laboratorio del liceo, y usarlo bien tiene sus pasos y sus trucos. Al final de la página sabrás por qué una muestra mal preparada solo muestra manchas.
Partes del microscopio
Para ver la piel transparente de una cebolla necesitas sostener el cristal, iluminarlo y enfocarlo. ¿Qué piezas hacen posible todo eso y cómo trabajan juntas?
Las dos partes con lentes son el ocular (por donde miras, arriba) y los objetivos (en el revólver, justo encima de la muestra). La muestra se coloca en la platina, sujeta con las pinzas, y el foco de luz la ilumina desde abajo.
Como la imagen se ve invertida (arriba y abajo, izquierda y derecha), si empujas la preparación hacia la derecha, la imagen parecerá moverse hacia la izquierda. Si sigues a un microorganismo que nada, tendrás que mover la preparación en sentido contrario a donde lo ves ir.
En el esquema del microscopio óptico hay tres partes señaladas con «?». Escribe el nombre de cada una y explica su función.
En el esquema del microscopio óptico hay tres partes señaladas con «?». Escribe el nombre de cada una y explica su función.
Nombra las dos partes del microscopio que contienen lentes y explica por dónde se mira y dónde se coloca la muestra.
Nombra las dos partes del microscopio que contienen lentes y explica por dónde se mira y dónde se coloca la muestra.
La imagen del microscopio está invertida. Si empujas con cuidado la preparación hacia la derecha mientras miras, razona hacia dónde parecerá moverse la imagen en el…
La imagen del microscopio está invertida. Si empujas con cuidado la preparación hacia la derecha mientras miras, razona hacia dónde parecerá moverse la imagen en el ocular y qué consecuencia práctica tiene esto cuando sigues a un microorganismo que se desplaza.
El aumento total
Al cambiar a un objetivo mayor pasan tres cosas: la imagen se ve más grande, el campo de visión (la zona de la muestra que ves) se hace más pequeño y llega menos luz, así que se ve más oscura. Por eso, al pasar de $10\times$ a $40\times$ conviene abrir el diafragma o subir la luz.
Un microscopio tiene un ocular de $10\times$ y objetivos de $4\times$, $10\times$ y $40\times$. Calcula el aumento total que se consigue con cada objetivo y explica con…
Un microscopio tiene un ocular de $10\times$ y objetivos de $4\times$, $10\times$ y $40\times$. Calcula el aumento total que se consigue con cada objetivo y explica con cuál de ellos hay que empezar siempre la observación y por qué.
Un microscopio tiene un ocular de $10\times$ y un objetivo de $20\times$. Calcula el aumento total. Si cambias a un objetivo de $40\times$, explica qué ocurre con el…
Un microscopio tiene un ocular de $10\times$ y un objetivo de $20\times$. Calcula el aumento total. Si cambias a un objetivo de $40\times$, explica qué ocurre con el tamaño de la imagen, con la zona de la muestra que llegas a ver y con la cantidad de luz.
Tamaño real y campo de visión
El aumento total dice cuántas veces se agranda la imagen, no cuánto mide la célula. Una célula de cebolla no mide ocho centímetros solo porque la veas a $400\times$: ese tamaño es el aparente. El tamaño real es mucho menor.
Para estimar el tamaño real se usa el campo de visión, el círculo que ves por el ocular. Si conoces su diámetro, comparas cuántas células caben:
$$\text{tamaño real} \approx \frac{\text{diámetro del campo}}{\text{número de células en fila}}$$Con el objetivo de $10\times$ (aumento total $100\times$) el campo de visión mide unos $1.5\ \text{mm}$ de diámetro. Si una célula de cebolla mide unos $0.25\ \text{mm}$…
Con el objetivo de $10\times$ (aumento total $100\times$) el campo de visión mide unos $1.5\ \text{mm}$ de diámetro. Si una célula de cebolla mide unos $0.25\ \text{mm}$ de largo, estima cuántas células en fila cabrían a lo ancho del campo y razona qué le ocurrirá al diámetro del campo al cambiar al objetivo de $40\times$.
Un compañero observa una preparación al microscopio a $400\times$. El campo de visión con ese objetivo mide $0.4\ \text{mm}$ de diámetro y la célula que observa ocupa…
Un compañero observa una preparación al microscopio a $400\times$. El campo de visión con ese objetivo mide $0.4\ \text{mm}$ de diámetro y la célula que observa ocupa aproximadamente la mitad de dicho diámetro. Tu compañero asegura: «Como el microscopio aumenta $400$ veces y la célula ocupa $0.2\ \text{mm}$, su tamaño real debe ser $0.2 \times 400 = 80\ \text{mm}$, ¡mide casi ocho centímetros!».\na) Identifica el error conceptual de su razonamiento y explica la diferencia entre el tamaño real y el tamaño aparente aumentado.\nb) Calcula el tamaño real correcto de la célula en milímetros y en micrómetros ($1\ \text{mm} = 1\,000\ \mu\text{m}$).\nc) Si colocaras células idénticas una detrás de otra en fila, ¿cuántas cabrían a lo largo de un centímetro de una regla?
Preparar una muestra
Dos piezas de vidrio son clave: el portaobjetos es la lámina rectangular sobre la que se coloca la muestra, y el cubreobjetos es el cristalito fino que la tapa, la aplana y la protege.
En el laboratorio del liceo también se usa el azul de metileno, por ejemplo para teñir células de la mucosa de la boca. Una preparación casera y húmeda (un pelo o una fibra de tu suéter en una gota de agua, con su cubreobjetos) sirve para practicar, pero se seca y se descarta. Una muestra permanente viene fijada, cortada muy fina, teñida y sellada, y dura años.
Vuelve al principio: la cebolla solo muestra sus «ladrillitos» si la capa es fina, está teñida y bien cubierta; una muestra gruesa o con burbujas solo da manchas.
Ordena los pasos para preparar una muestra de células de cebolla: (a) cubrir con el cubreobjetos con cuidado de que no queden burbujas, (b) colocar una fina capa de…
Ordena los pasos para preparar una muestra de células de cebolla: (a) cubrir con el cubreobjetos con cuidado de que no queden burbujas, (b) colocar una fina capa de cebolla sobre el portaobjetos, (c) añadir una gota de lugol para teñir, (d) retirar el exceso de líquido con papel de filtro.
¿Para qué se tiñen muchas muestras antes de observarlas al microscopio? Pon un ejemplo de tinción que se use en el laboratorio del liceo.
¿Para qué se tiñen muchas muestras antes de observarlas al microscopio? Pon un ejemplo de tinción que se use en el laboratorio del liceo.
Explica qué son el portaobjetos y el cubreobjetos y para qué sirve cada uno al preparar una muestra.
Explica qué son el portaobjetos y el cubreobjetos y para qué sirve cada uno al preparar una muestra.
Para observar algo al microscopio óptico hay que cortarlo en láminas muy finas. Explica por qué la muestra debe dejar pasar la luz y qué ocurre si es demasiado gruesa.
Para observar algo al microscopio óptico hay que cortarlo en láminas muy finas. Explica por qué la muestra debe dejar pasar la luz y qué ocurre si es demasiado gruesa.
Describe cómo prepararías una muestra húmeda de un pelo o de una fibra de tu jersey para verla al microscopio: qué materiales usarías y en qué orden actuarías. ¿Qué…
Describe cómo prepararías una muestra húmeda de un pelo o de una fibra de tu jersey para verla al microscopio: qué materiales usarías y en qué orden actuarías. ¿Qué diferencia hay entre esa preparación casera y una muestra permanente de laboratorio?
En la práctica de observación de células del epitelio bucal teñidas con azul de metileno, un grupo solo distingue manchas azules sin forma. Propón al menos tres errores…
En la práctica de observación de células del epitelio bucal teñidas con azul de metileno, un grupo solo distingue manchas azules sin forma. Propón al menos tres errores que pueden haber cometido al preparar la muestra y explica cómo repetirías la práctica para que salga bien.
Enfocar correctamente
Si la imagen se ve muy oscura, las causas pueden ser un foco poco intenso o un diafragma cerrado; se corrige subiendo la luz o abriendo el diafragma. Si solo ves un fragmento de la muestra, puede que esté mal centrada o que estés con un objetivo de mucho aumento; se corrige centrándola y volviendo a un objetivo menor.
Al observar una muestra, la imagen se ve muy oscura y solo se aprecia un fragmento de lo preparado. Indica dos causas posibles de cada problema y qué harías para…
Al observar una muestra, la imagen se ve muy oscura y solo se aprecia un fragmento de lo preparado. Indica dos causas posibles de cada problema y qué harías para corregirlas sin cambiar de objetivo.
¿Por qué hay que enfocar primero con el objetivo de menor aumento y reservar el tornillo micrométrico para los objetivos mayores? Explica qué puede ocurrir si se usa el…
¿Por qué hay que enfocar primero con el objetivo de menor aumento y reservar el tornillo micrométrico para los objetivos mayores? Explica qué puede ocurrir si se usa el tornillo macrométrico con el objetivo de $40\times$.
Has enfocado una célula con el objetivo de $10\times$ y cambias al de $40\times$: la imagen queda algo borrosa y más oscura. Explica qué tornillo debes usar para…
Has enfocado una célula con el objetivo de $10\times$ y cambias al de $40\times$: la imagen queda algo borrosa y más oscura. Explica qué tornillo debes usar para reenfocar (y cuál no debes tocar) y qué ajuste de la iluminación puede mejorar la imagen.
Cuidado y seguridad en el laboratorio
El microscopio es delicado y la muestra puede ser un riesgo. Estas normas protegen tanto el equipo como a ti.
Al transportarlo: sácalo del armario con las dos manos, una sujetando el brazo y la otra sosteniendo la base. Nunca lo agarres por el ocular, el tubo o la platina.
Al terminar la práctica, en este orden:
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Gira el revólver al objetivo de menor aumento y baja la platina.
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Apaga la luz.
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Retira la preparación y deséchala donde indique tu maestro.
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Limpia las lentes solo con papel especial para lentes.
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Guarda el microscopio con su funda.
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Lávate las manos.
Normas con muestras y tintes: usa bata y guantes, porque los colorantes (lugol, azul de metileno) manchan y pueden irritar la piel y los ojos. No pruebes ni huelas las muestras ni los tintes, porque pueden ser tóxicos o contener microorganismos. Desecha el material de vidrio roto y las muestras en el recipiente indicado, para evitar cortes y contaminación.
Describe cómo se debe transportar un microscopio del armario a la mesa de trabajo para no dañarlo: qué partes se agarran y con cuántas manos.
Describe cómo se debe transportar un microscopio del armario a la mesa de trabajo para no dañarlo: qué partes se agarran y con cuántas manos.
¿Qué hay que hacer al terminar una práctica de microscopía? Ordena y explica estas tareas: apagar la luz, limpiar las lentes con el papel especial, retirar y desechar la…
¿Qué hay que hacer al terminar una práctica de microscopía? Ordena y explica estas tareas: apagar la luz, limpiar las lentes con el papel especial, retirar y desechar la muestra, guardar el microscopio y lavarse las manos.
Nombra tres normas de seguridad del trabajo con muestras biológicas y tintes en el laboratorio del liceo y explica el motivo de cada una.
Nombra tres normas de seguridad del trabajo con muestras biológicas y tintes en el laboratorio del liceo y explica el motivo de cada una.
Más allá del microscopio óptico
El ojo humano distingue dos puntos separados si están a unos $0.1\ \text{mm}$ ($100\ \mu\text{m}$). El microscopio óptico llega a unos $0.2\ \mu\text{m}$, lo que alcanza para ver células y bacterias. Para algo más pequeño, como un virus, hace falta el microscopio electrónico (hasta $0.0002\ \mu\text{m}$), que usa electrones en lugar de luz.
| Instrumento | Menor detalle visible | Se ve bien |
|---|---|---|
| Ojo humano | $100\ \mu\text{m}$ | Un grano de arena |
| Microscopio óptico | $0.2\ \mu\text{m}$ | Células, bacterias |
| Microscopio electrónico | $0.0002\ \mu\text{m}$ | Virus, membranas |
El microscopio electrónico trabaja en vacío y con muestras muy tratadas, así que solo muestra células muertas. El óptico, en cambio, permite ver organismos vivos, como un protozoo nadando en una gota de agua.
Para comparar el tamaño de dos tipos de células (por ejemplo, las de la zona de crecimiento de una raíz de cebolla y las del bulbo), prepara una muestra de cada una, estima el tamaño con el campo de visión, anota los datos en una tabla (muestra, células en fila, tamaño estimado) y mide varias células, por ejemplo 10 de cada una, y saca el promedio para que el resultado sea fiable.
Un equipo de investigación quiere filmar en tiempo real cómo un protozoo unicelular nada y captura bacterias en una gota de agua estancada y, al mismo tiempo,…
Un equipo de investigación quiere filmar en tiempo real cómo un protozoo unicelular nada y captura bacterias en una gota de agua estancada y, al mismo tiempo, fotografiar con todo detalle la estructura interna de los virus que infectan a esas bacterias. Un estudiante propone utilizar únicamente un microscopio electrónico de transmisión para lograr ambos objetivos. Evalúa razonadamente su propuesta: explica por qué no es posible observar el protozoo vivo con este aparato y determina qué microscopio debe emplearse en cada caso y por qué.
Analiza los siguientes datos sobre el límite de resolución (la distancia mínima para distinguir dos puntos separados) de tres instrumentos:\n• Ojo humano:…
Analiza los siguientes datos sobre el límite de resolución (la distancia mínima para distinguir dos puntos separados) de tres instrumentos:\n• Ojo humano: $0.1\ \text{mm}$ ($100\ \mu\text{m}$).\n• Microscopio óptico compuesto: $0.2\ \mu\text{m}$.\n• Microscopio electrónico: $0.0002\ \mu\text{m}$.\n\nDispones de cuatro muestras biológicas:\n1. Una célula vegetal de cebolla ($100\ \mu\text{m}$).\n2. Una bacteria ($2\ \mu\text{m}$).\n3. Un virus de la gripe ($0.1\ \mu\text{m}$).\n4. La membrana plasmática de una célula ($0.008\ \mu\text{m}$).\n\na) Deduce qué instrumento necesitas como mínimo para distinguir cada una de las cuatro muestras.\nb) Justifica, a partir de estos datos, por qué en los siglos XVII y XVIII ya se pudieron observar células y bacterias, pero la existencia y estructura de los virus no se pudo demostrar hasta la invención del microscopio electrónico en el siglo XX.
Quieres comprobar si las células de la zona de crecimiento de una raíz de cebolla son más pequeñas que las del bulbo. Diseña la práctica: qué dos preparaciones harás,…
Quieres comprobar si las células de la zona de crecimiento de una raíz de cebolla son más pequeñas que las del bulbo. Diseña la práctica: qué dos preparaciones harás, cómo estimarás el tamaño de las células con el campo de visión, qué tabla de datos usarás y cuántas células medirás para que la comparación sea fiable.
La imagen invertida y el ciclo celular
Las lentes del microscopio invierten la imagen: una letra «e» se ve girada $180^\circ$ (al revés y de arriba abajo). Por eso una «p» se verá como una «d». Se comprueba recortando la letra de un periódico y mirándola al microscopio. El resultado se compara con tu predicción.
También con el microscopio se observa que toda célula nace de otra: el ciclo celular es la secuencia de etapas en que una célula crece, duplica su material genético y se divide en dos. Entenderlo es clave para el crecimiento, la reparación de tejidos y enfermedades como el cáncer; lo verás a fondo más adelante.
Al observar la letra «e» recortada de un periódico, en el microscopio se ve girada 180° (al revés y del revés). Predice cómo se verá la letra «p» antes de mirarla,…
Al observar la letra «e» recortada de un periódico, en el microscopio se ve girada 180° (al revés y del revés). Predice cómo se verá la letra «p» antes de mirarla, explica por qué ocurre esta inversión y describe cómo comprobarías tu predicción.
En una tienda de internet se oferta un «Microscopio óptico escolar con aumentos de hasta $50\,000\times$ que permite observar virus y moléculas por solo 30 pesos».\na)…
En una tienda de internet se oferta un «Microscopio óptico escolar con aumentos de hasta $50\,000\times$ que permite observar virus y moléculas por solo 30 pesos».\na) Utilizando la analogía de ampliar una fotografía digital con poca resolución (donde solo se obtienen píxeles más grandes, pero ningún detalle nuevo), rebate por qué ese anuncio es un engaño y predice qué verías en realidad al intentar forzar tantos aumentos con luz visible.\nb) Explica qué cambio físico fundamental aporta el microscopio electrónico respecto al óptico para lograr superar ese límite y mostrar con nitidez estructuras de unos pocos nanómetros.