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6e · Sciences
Les êtres vivants · La cellule

L'observation au microscope

Au collège, en SVT, Léa épluche un oignon et en détache une pellicule transparente. À l'œil nu, on ne voit rien de particulier. Au microscope, un véritable pavage de petites « briques » apparaît. Comment fonctionne cet instrument et comment l'utiliser sans abîmer ni l'appareil, ni la préparation ?

Les parties du microscope

Pour voir des cellules, il faut les éclairer, les agrandir et faire la mise au point. Chaque partie du microscope joue l'un de ces rôles.

Microscope optique vu de côté. Pièces optiques : l'oculaire et les objectifs. Pièces mécaniques : le bras, le pied, la platine avec ses valets, la vis macrométrique et la vis micrométrique. La source lumineuse éclaire l'échantillon par en dessous. oculaire objectifs valets platine source lumineuse bras vis macrométrique vis micrométrique pied pièces optiques pièces mécaniques

On regarde par l'oculaire, en haut. L'échantillon se place sur la platine, sous les objectifs que l'on choisit en tournant le revolver. Le diaphragme règle la quantité de lumière qui traverse la préparation.

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Sur le schéma du microscope optique, trois parties sont signalées par un « ? ». Écrire le nom de chacune et expliquer sa fonction.

Sur le schéma du microscope optique, trois parties sont signalées par un « ? ». Écrire le nom de chacune et expliquer sa fonction.

? tube objectif ? vis micrométrique bras ? source de lumière pied
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Nommer les deux parties du microscope qui contiennent des lentilles et expliquer par où l'on regarde et où l'on place l'échantillon.

Nommer les deux parties du microscope qui contiennent des lentilles et expliquer par où l'on regarde et où l'on place l'échantillon.

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Décrire comment il faut transporter un microscope du placard à la table de travail pour ne pas l'abîmer : quelles parties on saisit et avec combien de mains.

Décrire comment il faut transporter un microscope du placard à la table de travail pour ne pas l'abîmer : quelles parties on saisit et avec combien de mains.

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Le grossissement

Pourquoi on multiplie ? L'objectif forme une première image agrandie, puis l'oculaire agrandit cette image déjà agrandie.

Microscope avec un oculaire 10× en haut et un objectif 40× au-dessus de l'échantillon : l'image vue dans l'oculaire est grossie 400 fois. oculaire 10× objectif 40× grossissement total 400× 10× × 40× = 400×

Quand le grossissement augmente, l'image est plus grande, mais on voit une zone plus petite de la préparation (le champ d'observation diminue) et l'image est moins lumineuse.

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Un microscope a un oculaire de $10\times$ et des objectifs de $4\times$, $10\times$ et $40\times$. Calculer le grossissement total obtenu avec chaque objectif et…

Un microscope a un oculaire de $10\times$ et des objectifs de $4\times$, $10\times$ et $40\times$. Calculer le grossissement total obtenu avec chaque objectif et expliquer avec lequel il faut toujours commencer l'observation et pourquoi.

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Un microscope a un oculaire de $10\times$ et un objectif de $20\times$. Calculer le grossissement total. Si vous passez à un objectif de $40\times$, expliquer ce qui se…

Un microscope a un oculaire de $10\times$ et un objectif de $20\times$. Calculer le grossissement total. Si vous passez à un objectif de $40\times$, expliquer ce qui se passe pour la taille de l'image, pour la zone de l'échantillon que vous parvenez à voir et pour la quantité de lumière.

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Avec l'objectif $10\times$ (grossissement total $100\times$), le champ d'observation mesure environ $1{,}5\ \text{mm}$ de diamètre. Si une cellule d'oignon mesure…

Avec l'objectif $10\times$ (grossissement total $100\times$), le champ d'observation mesure environ $1{,}5\ \text{mm}$ de diamètre. Si une cellule d'oignon mesure environ $0{,}25\ \text{mm}$ de long, estimer combien de cellules alignées pourraient tenir dans la largeur du champ et expliquer ce qu'il adviendra du diamètre du champ en passant à l'objectif $40\times$.

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Préparer une lame

Pour qu'on puisse voir quelque chose, la lumière doit traverser l'échantillon. Il doit donc être très fin et transparent. On le place entre deux plaques de verre : la lame (plus grande, elle porte l'échantillon) et la lamelle (très fine, elle le recouvre et l'aplatit).

Lame et lamelle en coupe : l'échantillon dans une goutte d'eau est posé sur la lame et recouvert par la lamelle. lame lamelle échantillon + goutte Quatre étapes pour préparer un échantillon d'oignon : poser une fine couche sur la lame, ajouter une goutte de colorant, abaisser la lamelle inclinée à 45 degrés, retirer l'excès de liquide avec du papier filtre. 1 Poser l'échantillon pellicule d'oignon couche fine lame 2 Colorer goutte de lugol 3 Poser la lamelle lamelle 45° doucement 4 Retirer l'excès papier filtre liquide en trop

On colore les échantillons parce que les cellules sont presque transparentes : sans colorant, leurs parties se distinguent mal. On utilise par exemple l'eau iodée ou le lugol (oignon, jaune-brun) et le bleu de méthylène (cellules de la joue).

Une lame faite au dernier moment, avec de l'eau (cheveu, fibre de pull), est une préparation temporaire : elle sèche vite. Au laboratoire, une préparation permanente est fixée et scellée : elle se conserve des années.

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Ranger dans l'ordre les étapes de préparation d'un échantillon de cellules d'oignon : (a) recouvrir avec la lamelle en veillant à ne pas laisser de bulles, (b) placer…

Ranger dans l'ordre les étapes de préparation d'un échantillon de cellules d'oignon : (a) recouvrir avec la lamelle en veillant à ne pas laisser de bulles, (b) placer une fine couche d'oignon sur la lame, (c) ajouter une goutte de lugol pour colorer, (d) retirer l'excès de liquide avec du papier filtre.

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Expliquer ce que sont la lame et la lamelle et à quoi sert chacune lors de la préparation d'un échantillon.

Expliquer ce que sont la lame et la lamelle et à quoi sert chacune lors de la préparation d'un échantillon.

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Décrire comment vous prépareriez un échantillon humide d'un cheveu ou d'une fibre de votre pull pour l'observer au microscope : quel matériel vous utiliseriez et dans…

Décrire comment vous prépareriez un échantillon humide d'un cheveu ou d'une fibre de votre pull pour l'observer au microscope : quel matériel vous utiliseriez et dans quel ordre vous procéderiez. Quelle différence y a-t-il entre cette préparation improvisée et une préparation permanente de laboratoire ?

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Lors du TP d'observation de cellules de l'épithélium buccal colorées au bleu de méthylène, un groupe ne distingue que des taches bleues sans forme. Proposer au moins…

Lors du TP d'observation de cellules de l'épithélium buccal colorées au bleu de méthylène, un groupe ne distingue que des taches bleues sans forme. Proposer au moins trois erreurs possibles lors de la préparation de l'échantillon et expliquer comment refaire le TP pour qu'il réussisse.

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Faire la mise au point

Vis de mise au point : avec le même tour, la vis macrométrique déplace beaucoup l'objectif de faible grossissement, tandis que la vis micrométrique déplace très peu l'objectif 40×, presque contre la préparation. Vis macrométrique Vis micrométrique grand tour macrométrique préparation 4× grand tour micrométrique préparation 40× grand tour → grand déplacement mise au point approximative objectif de faible grossissement grand tour → déplacement minime affiner l'image objectifs de fort grossissement

Si l'image est sombre (c'est souvent le cas avec un objectif plus fort), le diaphragme est sans doute trop fermé ou la lumière trop faible : on ouvre le diaphragme ou on augmente la lumière. Si l'on n'en voit qu'un fragment (un croissant noir sur le bord du champ), c'est souvent que l'objectif n'est pas bien en place : le revolver n'est pas encliqueté.

L'image est inversée : si tu pousses la lame vers la droite, l'image se déplace vers la gauche dans l'oculaire. Une rotation de 180° n'est pas un simple reflet : un « p » apparaît comme un « d », et un « e » apparaît à l'envers (tête en bas). La raison : les lentilles forment une image inversée de droite à gauche et de haut en bas (rotation de 180°).

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En observant un échantillon, l'image est très sombre et l'on n'aperçoit qu'un fragment de la préparation. Indiquer deux causes possibles de chaque problème et ce que…

En observant un échantillon, l'image est très sombre et l'on n'aperçoit qu'un fragment de la préparation. Indiquer deux causes possibles de chaque problème et ce que vous feriez pour les corriger sans changer d'objectif.

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Pourquoi faut-il d'abord faire la mise au point avec l'objectif de plus faible grossissement et réserver la vis micrométrique aux objectifs plus forts ? Expliquer ce qui…

Pourquoi faut-il d'abord faire la mise au point avec l'objectif de plus faible grossissement et réserver la vis micrométrique aux objectifs plus forts ? Expliquer ce qui peut arriver si l'on utilise la vis macrométrique avec l'objectif de $40\times$.

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L'image du microscope est inversée. Si vous poussez délicatement la préparation vers la droite tout en regardant, expliquer vers où l'image semblera se déplacer dans…

L'image du microscope est inversée. Si vous poussez délicatement la préparation vers la droite tout en regardant, expliquer vers où l'image semblera se déplacer dans l'oculaire et quelle conséquence pratique cela a lorsque vous suivez un micro-organisme en déplacement.

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Lorsqu'on observe la lettre « e » découpée dans un journal, elle apparaît au microscope tournée de 180° (à l'envers et inversée). Prévoir comment apparaîtra la lettre «…

Lorsqu'on observe la lettre « e » découpée dans un journal, elle apparaît au microscope tournée de 180° (à l'envers et inversée). Prévoir comment apparaîtra la lettre « p » avant de l'observer, expliquer pourquoi cette inversion se produit et décrire comment vérifier votre prévision.

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Observer, dessiner et ranger

Un biologiste ne se contente pas de regarder : il représente ce qu'il voit. Un dessin d'observation doit comporter :

  • un titre (ce qu'on observe) ;

  • un dessin au crayon, aux traits nets, sans coloriage ni ombres ;

  • des légendes, avec des traits à la règle, sans croiser ;

  • le grossissement utilisé et une échelle (ici, une barre qui représente 50 µm).

Dessin d'observation de cellules d'oignon avec un titre, des légendes, un noyau, une paroi et l'indication du grossissement. Cellules d'épiderme d'oignon paroi noyau cytoplasme grossissement : × 400 échelle : 50 µm

À la fin de la séance :

  1. éteindre la source lumineuse ;

  2. remettre le plus petit objectif en place ;

  3. retirer la lame, jeter l'échantillon, nettoyer la lame et la lamelle ;

  4. nettoyer les lentilles avec le papier spécial seulement ;

  5. ranger le microscope (à deux mains) et se laver les mains.

Quelques règles de sécurité : lunettes et blouse (les colorants tachent et peuvent irriter) ; ne rien porter à la bouche ; manipuler les lames de verre avec soin (elles coupent) ; se laver les mains après avoir touché des échantillons biologiques.

Ce que l'on observe : cellules animales et végétales

Avec un microscope optique, on peut observer le contenu d'une cellule. Ce qui se voit dépend de la cellule :

Partie Cellule animale (joue) Cellule végétale (oignon, élodée)
Membrane oui oui
Cytoplasme oui oui
Noyau oui oui
Paroi non oui : entoure la cellule et lui donne sa forme
Chloroplastes non oui dans les parties vertes (élodée), pas dans l'oignon
Comparaison d'une cellule animale arrondie, avec noyau, cytoplasme et membrane, et d'une cellule végétale rectangulaire avec une paroi, un noyau et des chloroplastes. cellule animale noyau membrane cellule végétale paroi chloroplastes

Il existe aussi des organismes unicellulaires, formés d'une seule cellule (levure, paramécie) : ils nagent dans une goutte d'eau et s'observent vivants.

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Que faut-il faire à la fin d'une séance de microscopie ? Ordonner et expliquer ces tâches : éteindre la lumière, nettoyer les lentilles avec le papier spécial, retirer…

Que faut-il faire à la fin d'une séance de microscopie ? Ordonner et expliquer ces tâches : éteindre la lumière, nettoyer les lentilles avec le papier spécial, retirer et jeter l'échantillon, ranger le microscope et se laver les mains.

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Nommer trois règles de sécurité pour le travail avec des échantillons biologiques et des colorants dans le laboratoire du collège et expliquer la raison de chacune.

Nommer trois règles de sécurité pour le travail avec des échantillons biologiques et des colorants dans le laboratoire du collège et expliquer la raison de chacune.

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Un camarade observe une préparation au microscope à $400\times$. Le champ d'observation avec cet objectif mesure $0{,}4\ \text{mm}$ de diamètre et la cellule observée…

Un camarade observe une préparation au microscope à $400\times$. Le champ d'observation avec cet objectif mesure $0{,}4\ \text{mm}$ de diamètre et la cellule observée occupe environ la moitié de ce diamètre. Votre camarade affirme : « Comme le microscope grossit $400$ fois et que la cellule occupe $0{,}2\ \text{mm}$, sa taille réelle doit être $0{,}2 \times 400 = 80\ \text{mm}$, elle mesure presque huit centimètres ! ».\na) Identifier l'erreur de raisonnement conceptuelle et expliquer la différence entre la taille réelle et la taille apparente agrandie.\nb) Calculer la taille réelle correcte de la cellule en millimètres et en micromètres ($1\ \text{mm} = 1\,000\ \mu\text{m}$).\nc) Si l'on plaçait des cellules identiques les unes derrière les autres en file, combien pourraient tenir sur un centimètre d'une règle ?

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Vous voulez vérifier si les cellules de la zone de croissance d'une racine d'oignon sont plus petites que celles du bulbe. Concevoir le TP : quelles deux préparations…

Vous voulez vérifier si les cellules de la zone de croissance d'une racine d'oignon sont plus petites que celles du bulbe. Concevoir le TP : quelles deux préparations réaliser, comment estimer la taille des cellules à l'aide du champ d'observation, quel tableau de données utiliser et combien de cellules mesurer pour que la comparaison soit fiable.

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L'essentiel

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